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超分辨顯微鏡主要依賴熒光標記的樣品進行成像
超分辨顯微鏡主要依賴熒光標記的樣品進行成像
更新時間:2026-01-27 點擊次數:18
超分辨顯微鏡
是一種能夠突破傳統光學顯微鏡分辨率極限的先進顯微技術,以下是其基本工作原理和優點。
1.基于熒光成像:主要依賴熒光標記的樣品進行成像。樣品中的熒光分子在特定波長的光激發下會發出熒光,通過檢測這些熒光信號來獲取樣品的圖像信息。
2.克服衍射極限:傳統光學顯微鏡的分辨率受到光的衍射極限限制,而超分辨顯微鏡通過各種技術手段巧妙地繞過了這一限制。例如,結構光照明顯微術(SIM)利用光的干涉條紋照亮樣品,使熒光分子產生高頻信息,再通過計算重構獲得超分辨圖像;受激發射損耗顯微鏡(STED)則采用一束中心波長為λ的激光聚焦到樣品上,同時用另一束波長為λdep的激光包圍第一束激光,使周邊區域的熒光分子發生受激發射損耗而不發光,只保留中心極小區域內的熒光發射,從而提高分辨率。
3.單分子定位與追蹤:一些超分辨技術如單分子定位顯微鏡(SMLM),通過控制熒光分子的開關狀態,實現對單個分子的高精度定位和追蹤。多次重復這個過程,就能構建出超分辨的圖像。
超分辨顯微鏡
的使用注意事項:
1.操作規范
-小心操作:在使用顯微鏡時,要遵循正確的方法,例如在移動儀器時要一只手握鏡臂,一只手扶鏡座,兩上臂緊靠胸壁,切勿用一只手斜提,前后擺動,以防鏡頭或其他零件跌落。
-距離把控:在觀察標本時,顯微鏡離實驗臺邊緣應保持一定距離,以免顯微鏡翻倒落地。鏡柱與鏡臂間的傾斜角度不得超過45度,用完立即還原。
2.環境要求
-穩定放置:顯微鏡要放在一個平穩的地方,當實驗室或實驗臺的振動太大時,可以用某種穩健的臺子來安置顯微鏡。
-控制溫濕度:保持適宜的環境溫度和濕度,避免因溫濕度變化影響顯微鏡性能和樣品狀態。
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